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최근 자주 제기되는 질문: 1. 왜 ONPG 테스트를 사용하여 지연된 유당 발효를 구별할 수 있습니까?2. 왜 국가 표준은 ONPG 테스트에 3% 염화나트륨 삼당 철(또는 삼당 철)을 사용해야 한다고 명시합니까?3. Vibrio parahaemolyticus의 경우 OPNG 시험을 할 때 기준에 따라 톨루엔을 적가해야 하는 이유는 무엇입니까?기능은 무엇입니까?

저희 회사는 많은 정보를 검토하고 요약하여 아래에서 귀하와 공유했습니다.

원리: ONPG의 중국 이름은 o-nitrobenzene-β-D-galactopyranoside입니다.ONPG는 β-갈락토시다아제에 의해 갈락토스와 황색 o-니트로페놀(ONP)로 가수분해될 수 있으므로, β-갈락토시다아제의 활성은 배양 배지의 색 변화로 검출할 수 있습니다.

유당은 대부분의 미생물이 감지해야 하는 당입니다.그것의 신진 대사에는 두 가지 효소가 필요합니다. 하나는 세포 투과 효소이고 유당은 투과 효소의 작용으로 세포에 들어갑니다.다른 하나는 유당을 갈락토오스로 가수분해하는 β-갈락토시다아제입니다.유당과 포도당.β-갈락토시다아제는 또한 ONPG에 직접 작용하여 이를 갈락토스와 황색 o-니트로페놀(ONP)로 가수분해할 수 있습니다.유당 지연 발효기를 사용해도 24시간 안에 완료할 수 있습니다.따라서 한천 사면에서 배양 1을 채취하여 36°C에서 1-3시간 및 24시간 동안 원형으로 접종한 관찰 결과를 설명합니다.β-갈락토시다아제가 생성되면 1~3시간 안에 노란색으로 변하고, 그러한 효소가 없으면 24시간 안에 색이 변하지 않습니다.

위의 두 가지 효소에 따라 미생물은 다음 범주로 나눌 수 있습니다.

1 permease 및 β-galactosidase P + G +가있는 유당 발효 (18-24 시간) 박테리아;

2 지연된 유당 발효기(24시간 이상 소요) 투과효소는 부족하지만 갈락토시다아제: P- G+ 보유.

3 permease와 galactosidase가 모두 결여된 비유당 발효기: PG-.

ONPG 테스트는 다음과 같은 비발효 유당 박테리아(PG-)와 유당 지연 발효 박테리아(PG+)를 구별하는 데 사용할 수 있습니다.

1 후기 유당 발효기(P-G+)와 비유당 발효기(PG-)를 구별합니다.

(a) 살모넬라(-)의 시트로박터(+) 및 살모넬라 아리조네(+).

(b) Shigella sonnei(-)의 대장균(+).

3% 염화나트륨 삼당류 철(철 삼당류)에서 밤새 배양하여 ONPG 분석을 수행한 이유는 무엇입니까?우리 회사는 많은 정보를 참조했지만 명확한 진술이 없습니다.FDA 웹사이트에만 "Triple sugar iron agar slants에 테스트할 배양물을 접종하고 37°C(또는 필요한 경우 다른 적절한 온도)에서 18시간 동안 배양합니다. 1.0을 포함하는 영양소(또는 기타) 한천 경사면 % 유당도 사용할 수 있습니다."의미: 테스트 박테리아를 삼당류 철 배지에 접종하고 37°C에서 18시간 동안 배양했습니다.1% 유당을 함유한 영양 한천 사면(또는 기타) 배지도 허용됩니다.따라서 삼당류철배지에는 유당이 함유되어 있는 것으로 추정된다.밤새 성장한 후 박테리아는 우수한 활성 β-갈락토시다아제를 생성했습니다.이러한 박테리아를 사용하면 ONPG가 β-갈락토시다제에 의해 더 빠르게 분해될 수 있습니다.실험적 현상이 더 빠르고 더 잘 나타납니다.또한 β-갈락토시다아제를 완전히 방출하기 위해서는 톨루엔을 적가하고 수조에서 5분 동안 두어야 합니다.