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1.대사체 프로파일링 방법은 생물학적 시스템에서 대사체 풀을 측정하는 데 중요한 도구입니다.대부분의 대사체 프로파일링 방법은 상대적인 강도를 보고하거나 모든 대사체를 나타내는 몇 가지 내부 표준에 의존하지만 생물학적 세포 및 체액의 대사체 풀에 대한 정량적 설명을 위한 궁극적인 요구 사항은 절대 농도 결정입니다.우리는 여기에서 검출된 모든 대사 산물의 절대 정량화를 가능하게 하는 고처리량 및 민감한 가스 크로마토그래피/탠덤 질량 분석법(GC/MS/MS) 대상 대사 산물 프로파일링 방법을 보고합니다.이 방법은 메틸 클로로포르메이트 유도체화 및 중수소화 유도체화 시약으로 별도로 유도체화된 대사산물 표준으로 샘플을 스파이킹하여 정량화하는 방법을 기반으로 합니다.전통적인 전자 충격 이온화는 양성 화학적 이온화로 대체되는데, 후자는 분자 이온 및 기타 고분자량 조각을 훨씬 더 많이 보존하기 때문입니다.따라서 많은 동시 용출 대사산물 중에서 고유한 MS/MS transition을 선택하기가 더 쉬워졌습니다.현재 새로운 GC/MS/MS 방법은 아미노 및 비아미노 유기산 그룹에 가장 많이 속하는 67개의 공통 1차 대사산물로 구성됩니다.소변 및 혈청 샘플에 대한 방법의 적용 가능성을 보여줍니다.이 방법은 아미노산 및 비아미노 유기산의 정량적 GC/MS 대사산물 프로파일링을 위한 현재 방법론을 크게 개선한 것입니다.

2.24S-하이드록시콜레스테롤(24OHC)과 27-하이드록시콜레스테롤(27OHC)은 기원이 다른 두 가지 구조적으로 유사한 옥시스테롤입니다. 전자는 거의 전적으로 뇌에서 형성되고 후자는 대부분의 다른 기관보다 뇌에서 덜 형성됩니다.테스트할 가설: 신경 손상 및/또는 탈수초는 뇌에서 뇌척수액(CSF)으로 24OHC의 증가된 플럭스를 유발하는 반면, 혈액-뇌 장벽 결함은 순환에서 CSF로 27OHC의 증가된 플럭스를 유발합니다.동위원소 희석-질량 서로 다른 신경 및 노인성 질환을 가진 250명 이상의 환자로부터 CSF 및 혈장 내 두 옥시스테롤을 분석하기 위해 분광계를 사용했습니다. 두 옥시스테롤의 CSF 수치는 혈장 수치보다 서로 다른 질병에 의해 훨씬 더 많은 영향을 받았습니다.활동성 탈수초 질환 환자는 상대적으로 높은 24OHC/27OHC 비율로 CSF에서 24OHC 수준이 증가했습니다.일반적으로 수막염 환자는 24OHC/27OHC 비율이 낮은 두 스테로이드 수치가 높았습니다.알츠하이머병 환자는 CSF에서 24OHC 수준이 약간 증가했으며 27OHC는 더 적게 증가했습니다.다발성 경화증 환자는 활동 기간 동안 높은 24OHC/27OHC 비율로 24OHC 수치가 더 높은 경향이 있었습니다. 뇌척수액과 혈장에 있는 두 옥시스테롤의 측정은 신경계 질환 평가를 위한 기존의 생화학적 방법에 상당히 추가될 수 있습니다.