소식

우리 주변에는 평범해 보이지만 사실은 묵묵히 우리에게 많은 기여를 하는 숨은 영웅들이 많이 있습니다.Proteinase K는 분자 진단 산업의 "숨겨진 영웅"이지만, 업계의 "크고 강력한" 것과 비교할 때, proteinase K는 매우 낮은 수준이어서 오랫동안 그 중요성을 간과했습니다.새로운 왕관 전염병이 발생하면서 단백질 분해 효소 K에 대한 수요가 급증했고 국내외 공급이 소비보다 훨씬 뒤쳐져 모든 사람들이 갑자기 단백질 분해 효소 K가 매우 중요하다는 것을 깨달았습니다.
단백질 분해 효소 K의 용도는 무엇입니까
Proteinase K는 단백질 분해 효소 활성을 갖는 세린 프로테아제로 광범위한 환경(pH(4-12.5), 고염 완충액, 70°C의 고온 등)에서 활성을 유지할 수 있습니다.또한 proteinase K의 활성은 SDS, urea, EDTA, guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate 등에 의해 저해되지 않으며 일정량의 세제도 proteinase K의 활성을 증강시킬 수 있다. ), 식품(고기 연화), 가죽(모발 연화), 포도주 양조(알코올 정화), 아미노산 제제(깃털 분해), 핵산 추출, 제자리 교잡 등, 프로테이나제 K에 응용이 있습니다.가장 일반적으로 사용되는 응용 프로그램은 핵산 추출입니다.
Proteinase K는 핵산에 단단히 결합된 히스톤을 포함하여 샘플에 있는 모든 종류의 단백질을 효소 분해할 수 있으므로 핵산이 샘플에서 방출되어 추출물로 방출되어 추출 및 정제의 다음 단계를 용이하게 합니다.바이러스 핵산 검출에서 proteinase K는 바이러스 샘플링 솔루션의 중요한 구성 요소 중 하나입니다.프로테이나제 K는 바이러스의 외피 단백질을 분해하고 비활성화할 수 있어 운송 및 탐지 단계에서 더 안전합니다.또한 proteinase K는 RNase를 분해할 수 있으며 바이러스 RNA의 분해를 방지하고 핵산 검출을 용이하게 합니다.
단백 분해 효소 K의 하룻밤 명성
과학 연구 분야에서나 체외진단 분야에서나 핵산 추출은 가장 기본적인 실험이기 때문에 proteinase K는 항상 매우 중요한 존재였습니다.그러나 과거에는 proteinase K가 그 역할보다 훨씬 덜 알려져 있었습니다.이는 proteinase K의 수급 관계가 매우 안정적이었기 때문입니다.proteinase K의 공급이 문제가 될 것이라고 생각하는 사람은 거의 없을 것입니다.
새로운 왕관 전염병이 발생하면서 핵산 검사에 대한 수요가 급증했습니다.2020년 6월 말 현재 중국은 거의 9천만 건에 가까운 새로운 크라운 테스트를 완료했으며 이 수치는 전 세계적으로 더욱 놀라운 수치입니다.핵산 추출 실험에서 proteinase K의 작업 농도는 약 50-200 μg/mL입니다.일반적으로 핵산 샘플을 추출하는 데 약 100μg의 proteinase K가 필요합니다.실제 사용 시 핵산 추출 효율을 높이기 위해 Proteinase K를 더 많이 사용하는 경우가 많습니다.새로운 코로나 바이러스의 핵산 검출은 많은 양의 프로테이나제 K 수요를 가져왔습니다.proteinase K의 원래 공급과 수요 균형은 빠르게 깨졌고 proteinase K는 하루아침에 중요한 방역 물질이 되었습니다.
proteinase K 생산의 어려움
전염병의 발달과 함께 프로테이나제 K의 중요한 가치는 사람들에게 높이 평가되었지만, 프로테이나제 K의 과도한 저조로 인해 프로테이나제 K 생산에 관여한 국내 기업이 거의 없다는 것이 당혹스럽습니다. 프로테이나제 K 생산 확립 생산 과정에서 프로테이나제 K가 매우 특수한 단백질이라는 사실이 밝혀졌습니다.단기간에 proteinase K의 생산 능력을 확장하는 것은 매우 어려운 일입니다.
proteinase K의 대규모 생산은 다음과 같은 어려움에 직면해 있습니다.
1. 낮은 표현력
프로테이나제 K는 대부분의 단백질을 비특이적으로 분해할 수 있으며 발현 숙주 세포에 심각한 독성을 일으킬 수 있습니다.따라서 proteinase K의 발현 수준은 일반적으로 매우 낮다.프로테이나제 K를 높게 발현하는 발현 시스템 및 균주의 스크리닝에는 일반적으로 더 긴 주기가 필요합니다.
2. 색소 및 핵산의 잔류물
대규모 발효는 다량의 색소 및 숙주 핵산 잔류물을 도입합니다.이러한 불순물은 단순한 정제 공정으로는 제거하기 어려우며, 복잡한 정제는 비용을 증가시키고 회수율을 떨어뜨립니다.
3. 불안정성
Proteinase K는 충분히 안정적이지 않고 스스로 효소를 분해할 수 있으며 보호제 없이는 37°C에서 장기간 안정적으로 보관하기 어렵습니다.
4. 침전하기 쉽다.
프로테이나제K 동결건조분말을 제조할 때 동결건조분말 내 프로테이나제K의 고형분 함량을 크게 하기 위해서는 동결건조 보호제를 고농도로 첨가할 필요가 있으나, 단백분해효소 K의 농도가 20mg/mL 이상에 도달하면 용이합니다. 응집이 침전물을 형성하여 고형분 함량이 높은 단백분해효소 K의 동결 건조에 큰 어려움을 가져옵니다.
5. 대규모 투자
프로테이나제 K는 강력한 프로테아제 활성을 가지며 실험실에서 다른 프로테아제를 가수분해할 수 있습니다.따라서 proteinase K는 연구 개발 및 생산을 위한 전문 생산 영역, 장비 및 인력이 필요합니다.
XD BIOCHEM의 proteinase K solution
XD BIOCHEM has a mature protein expression and purification platform, and has rich experience in the expression and purification of recombinant proteins and optimization of production processes. Through the rapid formation of a research and development team, the large-scale production process of proteinase K has been overcome. The monthly output of freeze-dried powder is more than 30 KG. The product has stable performance, high enzyme specific activity, and no host cytochrome and nucleic acid residues. Welcome to contact XD BIOCHEM Obtain a trial package (E-mail: sales@xdbiochem.com Tel: +86 513 81163739).
XD BIOCHEM의 기술 솔루션에는 다음이 포함됩니다.
다중 복사 플라스미드 통합을 사용하여 발현 수준이 8g/L인 고발현 균주를 선택하여 proteinase K의 낮은 발현 수준 문제를 극복합니다.
다단계 정제 공정의 확립을 통해, 숙주 사이토크롬 및 proteinase K의 핵산 잔기가 표준 값 이하로 성공적으로 제거되었습니다.
보호 버퍼 제제의 고처리량 스크리닝을 통해 37°C에서 프로테이나제 K를 안정적으로 저장할 수 있는 버퍼를 선택했습니다.
스크리닝 버퍼는 proteinase K가 고농도에서 쉽게 응집되고 침전되는 문제를 극복하고 proteinase K의 고형분 동결 건조를 위한 기반을 마련합니다.

XD BIOCHEM 프로테이나제 K 샘플

XD BIOCHEM proteinase K 안정성 테스트: 실온에서 80일 후 활성에 큰 변화가 없을 것입니다.

XD BIOCHEM proteinase K 안정성 테스트: 실온에서 80일 후 활성에 큰 변화가 없을 것입니다.

XD BIOCHEM proteinase K와 경쟁 제품의 핵산 추출 효과 비교.핵산 추출 과정에서 각각 XD BIOCHEM과 Competitive proteinase K를 사용합니다.XD BIOCHEM proteinase K의 추출 효율은 더 높고 target 유전자의 Ct 값은 더 낮습니다.