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우리의 이전 연구는 KSHV 감염의 초기 단계와 후기 단계 모두에서 중요한 역할을 하는 것으로 나타났습니다.이 연구에서 우리는 단일 클론 항체 패널을 사용하여 ORF45의 상호 작용을 조사했습니다.이전에 확인된 세포외 조절 키나아제(ERK) 및 p90 리보솜 S6 키나아제(RSK) 단백질 외에도 ~38kDa 및 ~130kDa의 두드러진 단백질을 포함하여 몇 가지 다른 동시 정제 단백질을 발견했습니다.질량분석법은 38-kDa 단백질이 바이러스 ORF33이고 130-kDa 단백질이 세포 USP7(유비퀴틴 특이적 프로테아제 7)임을 밝혔습니다.우리는 ORF45의 고도로 보존된 카르복실 말단 19개 아미노산(aa)에 ORF33 결합 도메인을 매핑하고 ORF45의 중앙 영역에서 보고된 컨센서스 모티프에 USP7 결합 도메인을 매핑했습니다.Immunofluorescence 염색을 사용하여 형질감염된 조건과 KSHV 감염 세포 모두에서 ORF45와 ORF33 또는 USP7의 동시 국소화를 관찰했습니다.또한, 우리는 ORF33/USP7의 일부가 핵에서 세포질로의 ORF45 의존적 재편재화를 발견했습니다.우리는 ORF45가 ORF45의 ORF33 또는 USP7 결합 도메인이 삭제된 경우 폐지된 ORF33 단백질 축적의 증가를 유발한다는 것을 발견했습니다.또한 KSHV 게놈에서 ORF45의 보존된 카르복실 말단을 삭제하면 KSHV 감염 세포에서 ORF33 단백질 수준이 크게 감소하고 자손 비리온 생산이 중단됩니다.총체적으로, 우리의 결과는 ORF45 상호작용의 새로운 구성요소를 밝힐 뿐만 아니라 이러한 단백질 간의 상호작용이 KSHV 용해성 복제에 결정적임을 입증합니다. 카포시 육종 관련 헤르페스바이러스(KSHV)는 여러 인간 암의 원인 인자입니다.KSHV ORF45는 KSHV 용해성 복제에 필요한 다기능 단백질이지만 ORF45가 중요한 기능을 수행하는 정확한 메커니즘은 불분명합니다.우리의 이전 연구에 따르면 세포의 모든 ORF45 단백질은 고분자량 복합체에 존재합니다.따라서 우리는 용해성 복제 동안 ORF45의 역할에 대한 통찰력을 제공하기 위해 ORF45의 상호 작용을 특성화하려고 했습니다.단일 클론 항체 패널을 사용하여 KSHV 감염 세포에서 ORF45 상호 작용을 조사했습니다.우리는 ORF45의 두 가지 새로운 결합 파트너인 바이러스 단백질 ORF33과 세포 유비퀴틴 특이적 프로테아제 7(USP7)을 확인했습니다.우리는 또한 ORF45와 ORF33 사이의 상호 작용이 KSHV 바이러스 입자의 효율적인 생산에 중요하다는 것을 보여 주며, 이 상호 작용에 대한 표적 간섭이 KSHV 용해성 복제를 억제하는 새로운 전략을 나타낼 수 있음을 시사합니다.